即溫度在22…25℃；相對濕度45％RH…60％RH。適宜的環境溫濕度對操作者和病人都是非常重要的。當室溫超過28℃，濕度大于70[%]RH時，易有悶熱、出汗、煩燥、疲勞等反應，容易影響安定的情緒和敏捷的思維，使操作者的技術水平不能得到很好的發揮。同時病人也會出現心率快、出汗多等癥狀而增加手術難度；

當室溫低于20度時，只穿手術衣的操作者會感到冷，易影響操作動作的靈敏性和準確性，尤其是手指的細微動作。裸露的病人由于創傷機體抵抗力處于低下水平，更易發生感冒等并發癥。室內濕度低，物體表面浮塵隨某些動作，如鋪單、開關門等造成氣流改變而懸浮在空氣中。手術間內外溫差大，開門后部分區域的空氣形成蝸流，風速增大到約手術間原風速的4倍，此時物體表面附著物迅速飄浮于空氣中。根據美國CDC的調查表明手術室空氣中浮游菌數在700-800cfu/m3時就有經空氣感染的危險。

從結果可見，手術時鋪單至鋪單后2小時空氣污染最嚴重，此時正是手術階段。由于受重力作用，室內飄塵可直接沉降到手術創面，或操作者的手或手術器械上，因此加強控制此期的空氣污染對預防術后切口感染是致關重要的。

這些要求衛生防疫部門通過自己的監測確認各醫院手術室的達標情況，溫濕度記錄儀是一種很好的方法，減少了人員浪費，并使執法的公正性得到保證。